9.5. Az RNS tárolása

Az RNS helyes tárolására érdemes nagy gondot fordítani, mert nem megfelelő körülmények esetén órák alatt számottevően csökkenhet a kivonat épsége. A folyékony nitrogénben, vagy legalább -80°C-on gyorsan lehűtött és frissen eltárolt mintákból egy évvel később is jó minőségű RNS nyerhető ki. A guanidinium pufferben homogenizált minták szintén jól tárolhatók -80°C-on és később folytatható belőlük az RNS-kinyerés. A tisztított RNS etanolos csapadék formájában a legstabilabb, szintén -80°C-on tárolva, ilyenkor hónapokig, vagy akár még tovább is biztonságosan eltartható. Ha egy héten belül biztosan felhasználásra kerül, etanolos csapadékként -20°C-on is tárolható. A vizes oldatban levő RNS a legsérülékenyebb, ezért munka közben jégen tartandó! Rövid ideig oldott formában az RNS 1-10 μg/ml vizes oldatban (semleges, vagy enyhén savas pH), esetleg TE pufferben (10 mM Trisz-HCl, pH 7,5, 0,1 M EDTA) -20/-80°C-on tárolható. Ilyen körülmények között az RNS másodlagos szerkezete denaturálódik, vagyis egyes további alkalmazásokhoz renaturáció (re-folding) szükséges. Ha évekig akarjuk tárolni a kinyert RNS-t, vagy a legbiztosabb eltartási módot kívánjuk választani, etanolos csapadékként érdemes -20 vagy -80°C-on tárolni.

Ha nagyobb mennyiségű RNS-t izolálunk, a legjobb a koncentráció (és a minőség) meghatározása után alikvotokban -80°C-on tárolni, így elkerülhető a minta többszöri felolvadása. RNáz-inhibitort is lehet adni a tárolt mintákhoz, de ezzel csak akkor érdemes élni, ha a hozzáadott fehérje, vagy egyéb anyag biztosan nem fogja zavarni a soron következő felhasználási lépéseket. Előfordul még, hogy nagy tisztaságú, 100%-os formamidban, ill. a szabadalmazott RNAlater (Quiagen) nevű oldatban tárolják az RNS-t, ill. az utóbbi a biológiai minta tárolására is szolgál az RNS kinyerése előtt. Rövidebb idejű tárolásra alkalmas lehet még az 5 mM DTT-oldat is, mivel a DTT megszünteti a diszulfid-hidakat.